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中压层析柱的层析技术和过柱的技巧

更新时间:2022-04-08      点击次数:2357
   中压层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。它的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,但在加样时应将样品均匀分布于柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关。
 
  中压层析柱过柱的技巧:
  按过柱时的压力可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率较高的,但是时间也较长,例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。
 
  减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发,有时会在柱子外面有水汽凝结,另外有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气,噪音大,时间长,所以减压过柱用得比较少。
 
  加压过柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,但用外加压力可以使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(用鱼缸供气的加压泵就行)。特别是在容易分解的样品的分离中很适用。
 
  一般压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。因为加压过柱效率高,分离效果较好,所以加压过柱在普通的有机化合物的分离中是非常适用的。
 
  一些低沸点溶剂装柱时往往会在柱子中产生气泡,使柱子变花,利用加压过柱法在装柱时就可以有效地解决这个问题,而且可以使柱子很快装实。
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