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玻璃层析柱装柱的技巧和使用注意事项

发布时间:2022-11-17      点击次数:77
   玻璃层析柱适用于分子筛、离子交换、凝胶渗透与亲和层析。随着液相层析法进入血液制品生产,利用层析法,可纯化血浆中多种蛋白,例如白蛋白等等。越来越多生产单位相继使用,效果甚佳,甚为满意。
 
  玻璃层析柱装柱的技巧:
  柱层析的装柱非常重要,装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。湿法装柱很简单,使用也较普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆,柱子底部先用脱脂棉塞紧,然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。
 
  用漏斗将活好的固定相倒入柱子中,打开底部活塞,将柱子中高出固定相的溶剂放出。期间不断用橡皮棒敲打,将固定相敲实,做到密实均匀无气泡即可。
 
  很多时候用加压的方法可以很高效地装好柱子,而且在柱子中没有气泡产生。
 
  干法装柱与湿法装柱刚好相反的是,它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中,然后用油泵抽柱子底部,相当于减压过柱,直到柱子变得很结实,再用淋洗剂“走柱子”。
 
  干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后,由于溶剂和固定相之间的吸附放热,所以柱子容易变花,影响分离效果。
 
  玻璃层析柱使用注意事项:
  1、除氯化的碳氢化合物。丙酮、酮类化合物、脂肪族脂和苯酚之外,其他的所有有机溶剂均可适用。
 
  2、禁止使用氢氧化钠,盐酸或醋酸溶液,因上述溶液会损坏尼龙网筛。
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